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SuperQuickRT cDNA*鏈合成試劑盒說(shuō)明書(shū)
更新時(shí)間:2015-05-18 點(diǎn)擊量:1200

 

SuperQuickRT cDNA*鏈合成試劑盒說(shuō)明書(shū)

 

 

SuperQuickRT cDNA Kit

(For Real-time PCR)

SuperQuickRT cDNA*鏈合成試劑盒

(For Real-time PCR)

目錄號(hào):YJ2381

保存條件:-20℃。

規(guī)格說(shuō)明

 

     Cat. No.                            YJ2381B      YJ2381

     Kit Size                                25         100

     SuperQuickRT Mix                      12.5 μl      50 μl

     5×RT Buffer(For Real-time PCR)        55 μl       220 μl

     Primer Mix                            27.5 μl     110 μl

     dNTP Mix (2.5 mM Each)                55 μl       220 μl

     RNase-Free Water                       1 ml        1 ml

 

 

        本產(chǎn)品僅供科研使用,請(qǐng)勿用于臨床診斷及其他用途  

 

 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 

  本產(chǎn)品是為Real-time  RT-PCR研發(fā)的快速逆轉(zhuǎn)錄試劑,其包含從RNA模板逆轉(zhuǎn)錄

成cDNA*鏈所需的全部試劑,優(yōu)化的反應(yīng)體系為快速逆轉(zhuǎn)錄酶提供更可靠的反應(yīng)條

件。SuperQuickRT逆轉(zhuǎn)酶逆轉(zhuǎn)錄效率高,可對(duì)少量RNA模板進(jìn)行良好的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),

15分鐘即可完成熒光定量 PCR模板cDNA*鏈合成。另外,逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)溫度可以提

高到50 oC,可通讀GC含量高和二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的RNA模板。

 

產(chǎn)品特點(diǎn)

1.快速:42 oC,15min可完成cDNA*鏈合成。

2.反轉(zhuǎn)錄效率高:反轉(zhuǎn)錄效率高于90%。

3.靈敏度高:pg級(jí)模板也可以得到高質(zhì)量的cDNA。

4.通讀復(fù)雜模板:GC含量高和二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜模板。

 

 

注意事項(xiàng)

 

1.在操作過(guò)程中應(yīng)避免RNase污染,防止RNA降解或?qū)嶒?yàn)中的交叉污染,建議操作人

   員帶口罩和一次性手套并經(jīng)常更換手套,使用專(zhuān)門(mén)的儀器和耗材。

2.逆轉(zhuǎn)錄體系配制在冰上進(jìn)行操作,防止RNA發(fā)生降解。試劑盒的酶使用后盡快置于

   -20 oC保存,并盡量避免反復(fù)凍融。

3.Primer Mix是由Oligo(dT)和random primer配制而成,也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選用Oligo-dT

   Primer或Gene Specific Primer。

4.反應(yīng)體系可倍比放大,10 μl反應(yīng)體系可zui大使用1μg總RNA。

5.對(duì)于二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的RNA模板,建議在操作步驟之前,將模板RNA在65℃孵育5min立刻置于冰上,短暫離心后進(jìn)行下一步操作。

操作步驟

 

1.將模板RNA在冰上解凍;將試劑盒組分在室溫解凍后立刻置于冰上,使用前將每種

   溶液渦旋振蕩混勻,并經(jīng)短暫離心后使用。

2.根據(jù)以下表格配制反應(yīng)體系,渦旋震蕩混勻,短暫離心,使管壁上的溶液收集到管底。

 

試劑                10 μl反應(yīng)體系           終濃度

 

dNTP Mix (2.5 mM Each)               2 μl          500 μM Each

Primer Mix                           1 μl

                         1)

RNA Template                         X μl         10 pg~1 μg2)

5×RT Buffer(for Real-time PCR)       2 μl              1×

SuperQuickRT Mix                    0.5 μl

RNase-Free Water                  up to 10 μl

 

   注意:1)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要可使用Oligo-dT Primer或Gene Specific Primer,建議10 μl 反應(yīng)體系加入Oligo-dT Primer 25 pmol,或Gene Specific Primer 2.5 pmol 。

 

   2)如果總RNA量大于1 μg,請(qǐng)按比例擴(kuò)大反應(yīng)體系。

3.42℃孵育15分鐘。

   注意:對(duì)于二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜或GC含量高的模板,可以提高逆轉(zhuǎn)錄溫度至50℃,增強(qiáng)逆轉(zhuǎn)錄效率。

4.85℃孵育5分鐘,使逆轉(zhuǎn)錄酶失活。

5.短暫離心后置于冰上,再進(jìn)行后續(xù)Real-time PCR檢測(cè),如果需要長(zhǎng)時(shí)間保存,請(qǐng)

   置于-20℃。

 

   注意:進(jìn)行Real-time PCR反應(yīng)時(shí),逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的加量應(yīng)不超過(guò)PCR反應(yīng)總體積的1/10。

 

 

                                           2  

 

 

 相關(guān)產(chǎn)品信息

 

 

目錄號(hào)           產(chǎn)品名稱(chēng)                      產(chǎn)品特點(diǎn)

 

YJ0580        TRIzon總RNA提取試劑            適用范圍廣的RNA提取試劑

 

YJ0581        超純RNA提取試劑盒   兼具有適用范圍廣和純度高特點(diǎn)的RNA提取試劑

YJ0597        超純RNA提取試劑盒(含DNaseI)   靈敏度高,可識(shí)別pg級(jí)別的模板。

YJ0741        SuperRT cDNA*鏈合成試劑盒  與RNA親和力強(qiáng),能夠通讀GC含

量高,二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的RNA模板。

 

YJ2569        HiFiScript cDNA*鏈合成試劑盒    獲得cDNA產(chǎn)物逆轉(zhuǎn)錄(針對(duì)于熒光定量PCR)

 SuperQuickRT cDNA*鏈合成試劑盒(For Real-time PCR)

 

YJ2381                        僅需15分鐘,即可完成熒光定量PCR所需的cDNA

 

                                                                     即用型逆轉(zhuǎn)錄mix,只需加入RNA和水

                             SuperQuickRT MasterMix

YJ2391                                                即可反應(yīng)。僅需15分鐘,即可完成熒光                     (for Real-Time PCR)

                                                       定量PCR所需的cDNA

 

                                              熒光定量PCR—SYBR Green法

YJ0957        UltraSYBR Mixture

                                                 特異性強(qiáng)、靈敏度低、擴(kuò)增效率高

 

                                        熒光定量PCR—Taqman法

YJ0932        GoldStar Taqman Mixture 

                                                特異性強(qiáng)、靈敏度低、擴(kuò)增效率高

 

 

滬公網(wǎng)安備 31011802001677號(hào)

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